結腸癌耐藥細胞株開發(fā)涉及細胞培養(yǎng)及轉染，單細胞克隆及單克隆源性驗證，蛋白表達及結構特征篩選及鑒定，蕞終獲得優(yōu)質的細胞株。
 

　　結腸癌耐藥細胞株廣泛用于許多重要的應用，包括生物制品(如重組蛋白和單克隆抗體)生產、藥物篩選和基因功能研究。開發(fā)結腸癌耐藥細胞株的過程通常始于將所需的質粒轉染至選定的宿主細胞，一般是CHO或HEK 293細胞。轉染后，研究人員隨后篩選和定量分析高表達的細胞克隆。
 

　　一旦檢測到這些高產細胞株，便進一步對這些細胞和其產生的蛋白質進行驗證。傳統(tǒng)上用于細胞株開發(fā)的手動篩選方法耗時且需要大量勞力，因此對于此類工作，存在對高通量、自動化解決方案的巨大需求。
 

　　結腸癌耐藥細胞株穩(wěn)定整合試驗中需要考慮的幾個關鍵因素有：
 

　　1)，外源插入片段的拷貝數(shù)。多數(shù)情況下，低拷貝甚至是單拷貝可以減少人為實驗因素的干擾。
 

　　2)，整合的幾率，這不僅決定了穩(wěn)定株篩選的難易程度，而且還可以幫助人們更容易得到混合穩(wěn)定株。
 

　　3)，整合位點的轉錄活躍度，決定了穩(wěn)定株中外源片段的表達質量。理想的狀況是單拷貝，但轉錄活性比較高。
 

　　4)，整合后的穩(wěn)定性。不同的整合位點決定了外源片段在染色體中的穩(wěn)定性，有些區(qū)域易發(fā)生重組或者丟失，從而導致穩(wěn)定株再次丟失的情況。
 

　　5)，最好使用混合穩(wěn)定株或者獲得多個不同單克隆穩(wěn)定株。因為穩(wěn)定整合往往伴隨這插入失活宿主內源基因，所以實驗時通過使用混合穩(wěn)定株，或者對多個單克隆穩(wěn)定株進行比較，可以幫助研究人員獲得更精確的實驗數(shù)據(jù)。