熒光定量PCR技術(shù)，是通過在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號的變化實(shí)時監(jiān)測PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，對起始模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)驗(yàn)采用兩種定量方式，即定量和相對定量。熒光定量PCR可用于mRNA表達(dá)量水平檢測、MicroRNA表達(dá)量水平檢測和基因拷貝數(shù)檢測。實(shí)驗(yàn)的方法可分為SYBRGreenI法和TaqMan探針法。
　　
　　熒光定量PCR就是在PCR擴(kuò)增過程中，通過熒光信號，對PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時檢測。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時期，模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，所以成為定量的依據(jù)。由于熒光定量PCR的眾多優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù)，并成為基因表達(dá)差異和文章發(fā)表*的部分。熒光定量PCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測，很多沒有做過熒光定量PCR的研究者常常感到高深莫測，不知從何入手；甚至一些做過一些實(shí)驗(yàn)的研究者也會對數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時候，盡管知曉qPCR的原理和基本操作，仍然浪費(fèi)時間和精力，而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。
　　
　　服務(wù)要求
　　
　　需提供新鮮或保存完好的細(xì)胞（至少5×106）、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料；或純化好的總RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之間，完整性好）或總DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之間，完整性好）；或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl（反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好，純度在1.9-2.1之間）；同時提供待測基因序列或登錄號。
　　
　　報告內(nèi)容
　　
　　總RNA(或DNA)濃度，電泳圖片，擴(kuò)增曲線，熔解曲線，Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析（可選），實(shí)驗(yàn)報告以及剩余引物和模板（信諾金達(dá)可保存1個月）